domingo, 22 de mayo de 2016

BIORREMEDACION EN SUELOS HIDROCARBUOS

La biorremediación es una rama de la  biotecnología que usa un elemento biológico, en la mayoría de los casos microorganismos, para eliminar contaminantes de un lugar, sea suelo, sedimento, fango o mar. Esta tecnología se ha transformado en la colaboradora directa de la naturaleza, que no siempre es capaz de superar por sí sola grandes desequilibrios.



              ARTÍCULOS

sábado, 21 de mayo de 2016

ARTICULO 1

BIORREMEDIACIÓN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS
INTRODUCCION
La biorremediación tiene como objetivo mantener el posible crecimiento máximo de los microorganismos hasta que la fuente de carbono ( contaminantes orgánicos ) disminuye y, en consecuencia , la población microbiana disminuye.
Se necesitan factores físicos y químicos para un proceso de biorremediación eficiente; incluyendo Agua: El contenido de agua es uno de los factores más importantes para la degradación, ya que el agua constituye del 80 al 90% del peso en la composición molecular de las células bacterianas y es el principal nutriente [ 2 ].
• Ph: El valor del pH intracelular se encuentra entre 6,5 y 7,5, por lo tanto, este es el intervalo de pH requerida necesaria para el crecimiento de microorganismos óptimas.
• Temperatura: Las reacciones químicas y enzimáticas de la célula aumentan de forma concomitante con el aumento de la temperatura. Hay: una temperatura mínima para cada organismo, por debajo del cual no se produce crecimiento, una temperatura óptima a la que el crecimiento es más rápido, y una temperatura máxima por encima del cual se produce no más crecimiento. El óptimo considerado intervalo de temperatura para bacterias aeróbicas heterotróficas está entre 20 ° C y 35 ° C [ 3 ].
• Oxígeno: El oxígeno es el aceptor de electrones más utilizado por los microorganismos para degradar compuestos orgánicos en un ambiente aeróbico. Si el contenido de oxígeno del suelo es inferior a 2 mg / l, las condiciones son favorables para un ambiente anaerobio.
• Nutrientes: La parte sólida de la célula bacteriana está constituido por carbono, nitrógeno, hidrógeno, fósforo, y, a una más pequeña medida, potasio, calcio, magnesio, cloruros, hierro, y otros. El componente principal (50%) es de carbono. El contaminante a degradarse debe contener este elemento. El oxígeno, con 20%, es el segundo elemento más abundante en la célula. El oxígeno es necesario para las nuevas células y como aceptor de electrones, por lo tanto, es necesario contar con grandes cantidades de oxígeno para la degradación biológica 

OBJETIVOS
Limpiar un suelo contaminado con hidrocarburos por medio de la biorremediación, en un sitio contaminado ubicado dentro de las instalaciones de PEMEX en el estado de Tabasco, en el sureste México, donde la extracción de petróleo y la producción más grande procesos del país se llevan a cabo.

MATERIALES Y MÉTODOS
1)lotes de suelo se prepararon con un volumen aproximado de 3 800 m3 que fueron premeditados, a través del cultivo de la tierra. En esta etapa, el necesario nutrientes calculadas se mezclaron y se añadieron a la tierra; el suelo era aireado y mecánicamente homogeneizada durante 28 días para ir a la segunda etapa.

2.La segunda etapa consistió en la formación de Biopilas 70 m de longitud, 16 m de ancho y 2 m de                altura.  El procedimiento general fue como sigue


LA EXTRACCIÓN Y LA SEPARACIÓN DE LA TIERRA LIMPIA
El suelo limpio se separó del suelo contaminado en el área de estudio, a partir del punto en el que se observó contaminación. Durante esta actividad, se observó que la distribución de la contaminación era muy variables, ya que no había zonas en las que la contaminación apareció en 0,7 m de profundidad, mientras que en otras zonas, el suelo contaminado se presentó en más de 4,0 m de profundidad.

EXTRACCIÓN Y TRANSPORTE DE LA TIERRA CONTAMINADA
El suelo contaminado se extrajo en franjas de tierra de aproximadamente 15 m de ancho, con una excavadora Caterpillar 320, hasta una profundidad que oscila entre 5.0 a la 6.50 metros.

MUESTREO DE SUELOS DE BIOPILAS
Para evaluar periódicamente las concentraciones de HC en cada biopila, estos fueron monitoreados mensualmente. Doce puntos de muestreo se consideraron en cada biopila, a tres profundidades diferentes en los lados laterales de la biopila (0,5, 1,5 y 2,5 m) y a las 0,5, 1,2, y 1,8 m de profundidad en la parte superior.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los resultados del monitoreo reveló que la eliminación de HPH en Biopilas alcanzó un promedio de 43,2% después de pre-tratamiento (tratamiento en tierra), el 68,7% en el tratamiento a medio, y el 77,7% al final del tratamiento. Hay que señalar que las concentraciones HFH en los biopilas eran diferentes debido a que el suelo, aunque procedentes de la misma zona, era de diversas localizaciones y profundidades, y tenía diferentes concentraciones HFH iniciales. La eliminación se alcanzó después de 4 a 9 meses de tratamiento del suelo. Este efecto se ha estudiado anteriormente, lograr reducciones de 2,400 mg / kg a 700 mg kg -1 en 5 meses, lo que representa un promedio de 70% de reducción.
Se considera que la reducción de contaminantes fue a través de la degradación, ya que son hidrocarburos de fracciones pesadas y no contienen compuestos volátiles, o pueden tener ellos en una proporción muy baja. Se ha informado de que la porción de los hidrocarburos (mediados y fracción pesada) reducida debido a la volatilización es, en general, menos de 10% a 25 ° C durante los primeros 30 días [ 12 ].
La degradación máxima de contaminantes orgánicos se consigue normalmente en los primeros 2 meses; este patrón es similar en suelos contaminados con ambos tipos de hidrocarburos, mediados y fracción pesada. Este mismo patrón se ha informado por muchos autores de forma independiente de la concentración inicial
Biopilas 2 y 3 fueron los más lentos en la respuesta al tratamiento de limpieza, que dieron resultados por debajo del MPL hasta el sexto mes de tratamiento; esto puede haber sido debido a la mayor concentración inicial y porque el suelo vino de las capas más profundas, alcanzando el nivel freático.
En biopilas 4, 5, 6 y 7, los resultados estaban por debajo del MPL entre la tercera y cuarta meses de tratamiento. El comportamiento fue el esperado, porque estaban dentro del rango de tiempo teóricamente asumido por un biopila en las condiciones del sitio descrito en este documento. Aunque el suelo podría haber contenido también fracciones finas, la velocidad a la que se extrajo el suelo era más alta que la velocidad a la que se construyeron los biopilas; por lo tanto, el suelo estaba bajo condiciones aeróbicas durante un tiempo más largo que biopilas 2 y 3.
Para biopilas 8, 9, y 11, los valores cerca de la MPL se obtuvieron en el segundo mes de toma de muestras, pero, en la siguiente toma de muestras, que mostraron un aumento de 8 a 10%, para disminuir y llegar a concentraciones por debajo del MPL después de 4 meses finalmente
Para Biopilas 10, 12 y 13, las concentraciones iniciales eran muy cerca de la MPL, y la eliminación fue lento, pero hicieron llegar a la MPL, esto podría haber sido debido al hecho de que la velocidad de degradación es más lenta con una baja concentración de hidrocarburos

CONCLUSIONES

El método Biopilas remediación se aplica a la Terminal Marina "Dos Bocas", en el estado de Tabasco, resultó suficiente para eliminar los hidrocarburos de 27 400 m3 de tierra, ya que las concentraciones de HPH finales estaban por debajo de los límites máximos permisibles establecidos por la NOM 138-SEMARNAT / SS-2003, que para un suelo de uso industrial es de 6000 mg / kg.  Con el tratamiento previo cultivo de la tierra, un mayor porcentaje de eliminación de hidrocarburos se puede lograr. La aireación fue muy eficiente en el inicio del tratamiento; Por lo tanto, se considera que la biodegradación es aeróbica. El momento en el que se alcanzaron concentraciones permisibles era inferior a seis meses.

BIBLIOGRAFIA
 www.omicsonline.org

ARTICULO 2


AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE UNA NUEVA CEPA, Bacillus sp KJ629314, CON UN ALTO POTENCIAL EN LA DEGRADACION AEROBICA DE DIESEL

S. Cisneros-de La Cueva, M.A. Martínez Prado, J.A. Rojas-Contreras, H. Medrano-Roldan, and M.A. Murillo Martínez
Recibido el 2 de de febrero de , 2014; Aceptado el 2 de de abril de , 2014
INTRODUCCIÓN
Remediación de suelos contaminados se ha considerado como un tema ambiental importante y se estudió en todo el mundo. Entre las diferentes técnicas de rehabilitación, la biorremediación se ha demostrado que tiene el enfoque más eficaz para aliviar los problemas ambientales asociados con el suelo contaminado La biorremediación consiste en el uso de microorganismos autóctonos indígenas o introducidas para desintoxicar y degradar los contaminantes ambientales. La mayoría de los hidrocarburos del petróleo puede ser biodegradable por varias cepas microbianas; Sin embargo, cada uno es capaz de descomponer un grupo específico de moléculas
En tales casos, la inoculación de microorganismos que se caracteriza en suelo contaminado con hidrocarburos de petróleo (bioaumentación) es una de las opciones más prometedoras para conseguir su remediación sostenible.
OBJETIVO
Determinar la capacidad de biodegradación aeróbica de Bacillus sp KJ629314, aislado de un suelo contaminado TPH la minería; expuesto a una concentración amplia gama de diesel, como única fuente de carbono y donador de electrones en condiciones aerobias.
MATERIALES Y MÉTODOS
Diesel: suministrado por PEMEX (Mexican Petroleum Corporation)
a)      alcanos (42,7%),
b)      cicloalcanos (33,4%) 
c)      los compuestos aromáticos (23,9%),
Suelo: se recogió y se esteriliza en un horno a 200 ° C durante 48 h
Aislamiento de bacterias: se aislaron a partir de hidrocarburos de petróleo suelo contaminado de un sitio minero en San Dimas Tayoltita, Durango
a)      Método de placa de vertido
b)      Agar-Agar
c)      Alícuota de 0,2 ml de diesel a la superficie interior de las placas de Petri
d)       incubaron a 35ºC durante 72 h
Identificación de Bacterias:
1.      Extracción de ADN: se extrajo de los gránulos resultantes de la centrifugación de 2,0 ml alícuota de cultivos bacterianos mixtos y puros activos, utilizando el método Winston
2.      polimerasa reacción en cadena (PCR): El gen 16S rRNA se amplificó utilizando cebadores ZVN-1 y ZVN-2
        a) Desnaturalización inicial del ADN a 95 ° C  b)  hibridación 65 a 60 ° C   c) extensión a 72 ° C
3.     El análisis filogenético: se analizaron con la versión de software MEGA
Fase experimental:
1.       Experimentos en el microcosmos:
a) matraz 250 ml : 160 g de arena
                             Sal mineral (N: P de 15 : 1)
                              Concentraciones diesel (10.000; 20.000; 30.000; 40.000 y 50000; mg / kg )
                             Inóculo bacteriano fue añadido al microcosmos de 107 células / g de suelo
                               Agua del suelo se ajustó a 70%
                               Incubaron a 30 °
2. Cuantificación Diesel: Se determinó por extracción soxhlet usando 10 g de suelo
3. Monitorización microbiana: se realizó a los 0, 5, 10, 15, 30, 45, y 60 días
RESULTADOS
Hidrocarburos de cadena larga que degradan bacterias: Aislamiento e identificación



Figura 1. Muestra el análisis filogenético de KJ629314 Bacillus sp por BLASTN utilizando la región variable de 16S rRNA y registrada en el Banco de la GEN en el Centro Nacional de Información Biotecnológica (NCBI). La cepa aislada comparte una similitud de genes 16S rRNA de 100% que corresponde a varias cepas del género Bacillus: Bacillus thuringiensis, Bacillus cereus, y Bacillus amyloliquefaciens.



Figura 2. Muestra la observación microscópica de la prueba de tinción de Gram para confirmar la morfología de las bacterias, son bacilos Gram positivos.


CONCLUSIONES
Bacillus sp, las bacterias aisladas de suelo extracción contaminada con TPH mostraron que este cultivo puro fue capaz de crecer en diesel como fuente de carbono y energía f (donador de electrones, ED) en condiciones aeróbicas utilizando oxígeno como electrones aceptor (EA).
Biodegradación de KJ629314 Bacillus sp en diesel mostraron que las bajas concentraciones de 10.000 y 20.000 ppm causaron un efecto estimulante positivo en el crecimiento microbiano con una eficiencia superior en la biodegradación de hidrocarburos.

BIBLIOGRAFÍA
file:///C:/Users/USER/Downloads/v13n2a6.pdf

ARTICULO 3


POTENCIAL DE BIODEGRADACIÓN  DE LOS SUELOS EN TABRIZ  REFINERÍA DE PETRÓLEO Y  LA ELIMINACIÓN
DE HIDROCARBUROS SOLIDOS POLI CÍCLICOS

RESUMEN




  
Se dice que los hidrocarburos aromáticos poli cíclicos (HAP), estos hidrocarburos entran a jugar un papel en cuanto a la contaminación del ecosistema ya que aparte de encontrarse en los suelos se pueden encontrar en diferentes partes petroquímicas como lo son las alcantarillas. Por esta razón los microorganismos juegan un papel importante ya que son Potencial de biodegradación de los suelos en Tabriz  refinería de petróleo  la eliminación  de Hidrocarburos solidos Poli cíclicos, ya que hay bacterias como las Bacillus, Pseudomonas, Proteus, Clostridium, Staphylococcus, Acinetobacter, Mycobacterium, Rhodococcus, Micrococcus, las cuales son capaces de reducir la contaminación de petróleo en Tabriz. En cuanto a los materiales y métodos se  cogieron muestras de diferentes regiones de Tabriz las cuales fueron empacadas en bolsas desinfectadas y llevadas al laboratorio, posteriormente se llevó a cabo la preparación de un medio de agar nutritivo en donde se iban a colocar bacterias como las anteriormente mencionadas con concentración de suelo en diluciones de 10-1 a 10-4  las cuales se incubaron a 28°C durante una semana. Al transcurrir esto se contaron las colonias que habían crecido en el medio y se les aplico  naftaleno el cul es un hidrocarburo aromático poli cíclico, para poder saber si estas bacterias formadas tenían la capacidad de la descomposición de este compuesto, este tratamiento fue comparado con un caldo de mueller el cual es un medio de agar líquido, en el que aplicaron solución de las concentraciones anteriormente mencionadas con tolueno y con bacterias y se llevó a la nevera para poder comparar cuál de los dos descomponía mas rápido el naftaleno y el petróleo. Como resultados se obtuvieron que las bacterias sembradas en el agar olido presentaron una mayor descomposición en comparación con el tolueno ya que presento un sobrenadante el cual se llevó  a cabo por el espectrofotómetro el cual mostro una longitud de onda 250-500nm, en comparación a los resultados de las bacterias los cuales presentaron una descomposición de 95%. En conclusión se obtuvo que las bacterias tienen la capacidad de biorremediar los suelos que son infectados con hidrocarburos y además que están ayudan a pasar estos hidrocarburos en compuestos asimilables para la planta.



BIBLIOGRAFIA
·         khosrow sadighbayan 1*, mahnaz mazaheri assadi2, abbas farazmand3, ali reza monadi naser aliasgharzad5, haedeh mobaiyen6, ramin zadghaffari, 2014. biodegradation potential of  oils in tabriz petroleum refinery  for removing solid polycyclic hydrocarbons tomado de:
                http://soeagra.com/abr/march_2016/11f.pdf